分泌PD-1抗体的EGFR-CAR-T细胞可明显抑制胃癌的进展

目的：探索分泌PD-1 scFv的CAR-T细胞对胃癌的抗瘤功效。方法：选择EGFR作为CAR-T细胞的靶标，构建二代EGFR-CAR-T细胞（EGFR BB-z）和分泌PD-1 scFv的四代EGFR-CAR-T细胞（EGFR BB-z/E30），通过体外激活以及靶细胞长期刺激检测其抗肿瘤活性，通过胃癌移植瘤小鼠模型检测其肿瘤抑制能力。结果：胃癌组织及细胞均高表达EGFR（均P<0.01）。通过慢病毒感染的方式成功获得EGFR BB-z和EGFR BB-z/E30细胞。体外实验表明，与EGFR BB-z相比，EGFR BB-z/E30具有更长效的增殖能力及更强的肿瘤杀伤活性（均P<0.01）。体内实验显示了EGFR BB-z/E30在胃癌细胞皮下移植瘤模型和胃癌人源性肿瘤异种移植瘤（patient-derived tumor xenograft，PDX）模型中具有明显的肿瘤抑制能力（均P<0.01），并可显著增加肿瘤部位 T 细胞的浸润（P<0.01），减少 EGFR BB-z/E30 细胞表面 PD-1 的表达（P<0.01）和高分泌 IFN-γ 的水平（P<0.05）。结论：分泌PD-1 scFv的EGFR-CAR-T细胞EGFR BB-z/E30可对胃癌进展产生显著的抑制作用，为胃癌治疗提供一种潜在新策略。     

奥马哈系统干预在老年膀胱肿瘤患者术后膀胱灌注化疗中的应用

目的探讨奥马哈系统干预在老年膀胱肿瘤患者术后膀胱灌注化疗中的应用效果。方法选取2018年1月-2019年6月于儋州市人民医院泌尿外科住院治疗的老年膀胱癌术后患者120例,按照随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组60例。所有患者接受术后膀胱灌注化疗,给予对照组患者实施常规干预,观察组患者使用奥马哈系统进行干预,比较2组患者干预后膀胱灌注情况、膀胱灌注依从性、自我管理效能及生活质量。结果观察组患者按时灌注比例显著高于对照组(P<0.01);患者的肿瘤知识、灌注知识、不良反应处理及定期复查评分均显著高于对照组(P<0.05);观察组的正性态度、自我决策、自我减压评分及自我管理效能总分均显著高于对照组(P<0.05);观察组生活质量评分(QOL)中的躯体领域、心理领域、社会领域的评分和总分均显著高于对照组(P<0.05)。结论奥马哈系统干预可改善老年膀胱肿瘤患者术后膀胱灌注化疗情况,提高其依从性、自我管理效能及生活质量。     

右美托咪定基于PI3K/AKT/CREB信号通路对肝脏缺血再灌注损伤大鼠干预作用研究

目的:研究右美托咪定对肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠的干预效果及对PI3K/AKT/CREB信号通路的影响.方法:80只SPF级SD大鼠夹闭肝脏左侧和中侧门脉三合体夹闭肝脏左侧和中侧门脉三合体30min制备肝脏缺血再灌注损伤模型,后随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、右美托咪定低剂量组(Dex-L)、右美托咪定高剂量组(Dex-H);每组再灌注6h和12h分别各处死10只.假手术组仅麻醉后开腹不阻断肝脏血流.Dex-H组腹腔注射100μg/kg右美托咪定,Dex-L组腹腔注射50μg/kg右美托咪定,假手术组和模型组仅注射溶剂.全自动血液生化分析仪检测大鼠血清谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)水平;HE染色观察肝脏病理变化;生化试剂盒检测血清中谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的含量或活性;Western Blot法检测PI3K,pAKT,AKT,CREB蛋白的表达水平;PCR检测BAX和Bcl2基因表达水平.结果:与Sham组相比,Model组大鼠血清ALT和AST水平在不同时间点均显著增高(P<0.05),与模型组相比,不同剂量的右美托咪定干预后ALT和AST水平均显著降低(P<0.05).Model组的肝脏细胞出现明显肿胀变性,肝小叶结构紊乱;不同剂量的右美托咪定干预6和12h后,肝脏病理均有不同程度的改善,且肝脏MDA水平较Model组显著下降,SOD和GSH水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,与模型组相比,不同剂量的右美托咪定干预6和12h后,模型组PI3K、AKT的蛋白磷酸化、CREB水平显著增高(P<0.05),PCR结果显示与模型组相比不同剂量的右美托咪定干预6和12h后,BAX表达量显著下降(P<0.05),Bcl2表达量显著升高(P<0.05).结论:右美托咪定可显著改善肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠的肝脏病理学和血清学指标,抑制氧化应激反应和凋亡标记物,其作用机制可能与激活PI3K/AKT/CREB信号通路有关.     

加速康复方式对老年患者全膝关节置换术后的影响

目的探讨不同的康复方式对老年全膝关节置换术患者术后焦虑、镇痛效果及生活质量的影响。 方法选取2017年11月到2020年6月于海南西部中心医院骨科门诊收入院的退行性膝关节炎老年患者100例,年龄≥65岁,均为初次行单侧全膝关节置换术,排除存在既往膝关节手术史、下肢其他关节功能障碍、凝血功能异常、下肢深静脉血栓(DVT)以及依从性差的患者。所有患者由同一高年资手术医师完成手术。按随机数字法分为两组,其中实验组给予加速康复措施,对照组给予常规康复措施,记录包括手术时间、住院时间、术中出血量,评估住院指标。于术前、术后1个月、术后6个月评估患者疼痛视觉评分(VAS)、焦虑自评量表系统评分(SAS)、膝关节综合评分(AKS)及生活质量评分(SF-36)。记录患者自手术至术后6个月内发生的手术相关性感染、DVT、假体松动、关节返修、骨关节炎进展等发生情况。计量资料采用独立样本t检验,重复测量资料比较采用球形检验,若不满足球型分布,需采用Green house-Geisser方法对自由度进行校正后计算;计数资料采用卡方检验或Fisher精确检验。 结果实验组较对照组手术时间(t＝8.618)、住院时间(t＝4.116)较短,首次下床时间(t＝16.360)较早,术中出血量及住院总花费较少(t＝16.359、5.839,均为P<0.05)。经治疗,两组VAS评分、SAS评分均降低,AKS评分、SF-36评分均升高。术前、术后1个月、术后6个月两组患者SAS、VAS、AKS及SF-36评分均不满足球型分布,实验组SAS、VAS评分均低于对照组(F＝5.201、9.018),AKS评分(F＝7.231、10.205)、SF-36评分(F＝20.102、7.118)均高于对照组,差异有统计学意义(均为P<0.05),且无交互作用(均为P>0.05)。实验组并发症发生率为10.0%,对照组为28.0%,差异有统计学意义(χ²＝5.263,P＝0.022)。 结论加速康复外科可优化老年全膝关节置换术患者的住院指标,减少术中出血及术后并发症,缓解焦虑,提高镇痛效果、膝关节功能及生活质量。     

乙型肝炎性肝癌和酒精相关性肝癌患者外周血中T细胞亚群表达差异和价值

目的:分析乙型肝炎性肝癌（HBV-HCC）和酒精相关性肝癌（ALC-HCC）患者外周血中T 细胞亚群表达差异和价值。方法:将2016年07月至2018年10月期间于本院接受诊治的65例乙型肝炎性肝癌患者作为HBV-HCC组,另选择同期于本院接受诊治的58例酒精相关性肝癌患者作为ALC-HCC组。经全自动生化分析仪及流式细胞仪对两组患者的T细胞亚群指标表达情况进行检测,并对比分析两组患者的肝功能Child-Pugh分级。结果:两组患者的肝功能Child-Pugh分级对比,差异无统计学意义（P＞0.05）;HBV-HCC组患者外周血中CD3+、CD8+、CD4+CD45RA+值高于ALC-HCC组,但外周血中CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+、CD8+CD28+值低于ALC-HCC组,差异有统计学意义（P＜0.05）;单因素分析发现,患者年龄、BMI、手术类型、临床分期、原发病灶大小、血管浸润及生存时间中位数与患者预后存在相关性,差异有统计学意义（P＜0.05）;多因素Logistic回归分析发现,患者年龄≥60岁、BMI＞24 kg/m2、开腹手术、临床分期、原发病灶＞3.6 cm、血管浸润及生存时间中位数＜72个月是影响患者生存质量的独立因素,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:乙型肝炎性肝癌和酒精相关性肝癌患者外周血中T 细胞亚群表达具有明显差异,能视作临床评判肝癌患者病情演变及疗效、预后的重要指标。     

胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探究胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:差速离心法提取胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901外泌体,透射电镜和Western blot鉴定外泌体,将U937细胞与PMA共孵育诱导U937细胞分化为巨噬细胞的同时分别与PBS、GES-1 exo、MGC-803 exo、SGC-7901 exo、IL-4孵育48 h,流式细胞术检测孵育后各组细胞CD206和HLA-DR表达,qRT-PCR检测CCL17、CXCL8、IL-10、TGF-β、TNF-α、IL-6、IL-1β表达,Western blot检测p-NF-κB、NF-κB、IκBα表达水平,将各组诱导后的U937细胞与MGC-803、SGC-7901共培养后,收集MGC-803、SGC-7901细胞,MTT检测各组细胞的增殖能力,Transwell小室法检测各组细胞的迁移能力。结果:差速离心法提取的外泌体符合外泌体的形态特征,并且在激光共聚焦显微镜下观察到外泌体可被U937细胞摄取,与MGC-803 exo、SGC-7901 exo共孵育后的U937细胞CD206显著高表达,HLA-DR低表达（P＜0.05）,CCL17、CXCL8、IL-10、TGF-β表达显著上调（P＜0.05）,TNF-α、IL-6、IL-1β表达显著下调（P＜0.05）,NF-κB磷酸化水平显著增加（P＜0.05）,IκBα表达显著增加（P＜0.05）,并且与MGC-803 exo、SGC-7901 exo诱导极化后的巨噬细胞共培养组MGC-803、SGC-7901细胞增殖和迁移能力显著增强（P＜0.05）。结论:胃癌细胞能够通过激活NF-κB信号通路促进M2型巨噬细胞极化进而诱导MGC-803、SGC-7901细胞增殖和迁移能力的增强。     

心脏彩色多普勒超声在高血压左室肥厚伴左心衰竭患者诊断中的应用价值

<正>随着社会老龄化进程的加快,老年性疾病也随之增加,严重地危害着患者的身体健康。高血压是一种多发病、常见病,多发生于老年人群,随着病程的增加,患者会出现左心室肥厚,甚至伴有左心衰竭,此时患者会出现气促、气喘等症状[1]。随着医学技术的发展,心脏彩色多普勒超声诊断已经广泛地应用于临床,该检查方法具有操作简便、分辨率较高、准确性和安全好等优点,对高血压患者左心室肥厚伴随左心衰竭具有重要的诊断价值[2,3]。本研究